| １：質量数 | H | ２： 陽子１個 中性子１個 |
H 重水素 放射線を出さない。 |
|
| １：陽子の数 | １：陽子１個 |
| 3： 陽子１個 中性子２個 |
H ３重水素＝トリチウム 放射線を出す。 放射性同位元素 （RI：radio isotope） |
 トリチウムチミジン(3H-T) |
| １：陽子１個 | ラベル：DNA合成をチェックするときはチミジンを使う。 トリチウムチジミンはDNAの複製中に取り込まれる |
例 トリチウムチミジン(3H-T)を使ったパルスラベル実験
| 細胞培養 | 識別 | 培養状況 |
| 非同庁培養 | Cell Cycle(G1、S、G2、M、G0) がまじる |
|
| ↓細胞洗浄 | 3H-T | トリチウムチジミンを入れる |
| S期の細胞のみ 3Hを取り込む |
G1、G2、M、G0 ➡ラベルされないS ➡ラベル（識標）される |
参考例
トリチウムチミジン(3H-T)で活性化Tリンパ球をマーキング
① 遺伝子発現の調節
オペロン説 Jacob&Monod：ジャコブとモノー（1940）
| E-coli（大腸菌）・・・栄養源（場合） | 利用 |
| Glc：グルコースの場合 | そのままGlcを利用 |
| Glcがなくて Lac：ラクトースの場合 |
しかたなくLacを利用 しかし、Lacは２糖 Lac➡Gal：ガラクトース+Glc （分解酵素：βガラクトシダーゼ：β-gal） |
| 乳糖 |
Glcがなくて
Lac：ラクトースの場合
ラクトース オペロン＝複数のコード領域をもつもの
構造遺伝子＝コード領域
lacZ➡β-gal
lacY➡Lac代謝に関わるタンパク質
lacA➡Lac代謝に関わるタンパク質
復習
プロモーター
いろいろとまとめていたけど。
この動画最高にわかりやすいですよ！！
② 転写制御
転写のレベルを制御する
塩基配列のミスマッチ校正機能
鋳型 －A T C－
複製 －T A A－ （←・・・ミスマッチ）
DNAポリメラーゼには校正機能がある
ヒトのDNAポリメラーゼがミスマッチする確率から校正し修復するまでの確立。
| 過程 | 確立 |
| ミスマッチ | 10の-5乗 （10万回に1回ミス） （1回複製すれば3万個間違える計算！！ダメ） |
| ↓ | |
| 校正機能 | 10の-9乗（1/10億） |
| ↓ | |
| 修復機能 | 10の-10乗（1/100億） まで改善される |
①-Ⅰ １塩基置換＝点突然変異（point mutation）
1塩基が変化することを
| 塩基配列＝アミノ酸 | 塩基配列＝アミノ酸 | アミノ酸が 一緒だと：同義 違うと：ミスセンス |
|
| GAT＝Asp | ➡ | GAC＝Asp | 同義 |
| ➡ | GTT＝Val | ミスセンス | |
| ➡ | GAA＝Glu | ミスセンス |
①-Ⅱ ナンセンス変異
| 塩基配列＝アミノ酸 | 塩基配列＝アミノ酸 | ||
| TCA＝Ser | ➡ | TGA=Stop 終始 |
ナンセンス変異 |
タンパク質コード領域内のアミノ酸に対応するコドンに点突然変異が起こり、終始コドン(UAG, UAA, UGA)に変わったためタンパク質合成が中途で終結するようになった突然変異。
② フレームシフト変異
１塩基の挿入or欠損
正常型にC：（1個のヌクレオチド）が入るとずれる。
入った後、アミノ酸が変異する
フレームシフト変異の具体的な有名な例
：病名＝鎌状赤血球貧血病
日本ではない病気（あっても１家系か２家系）
アメリカ・欧米・アフリカ・中東には多い。
原因：熱帯熱マラリア（マラリア原虫）
4種類ある。
ヘモグロビン β鎖
6番目
Glc➡Val
DNA複製
複製開始点からDNApolumeraseからDNAを増幅し複製する方法が見つかる。
原核・・・1ケ
真核・・・複数ケ
人工的に複製する方法
目標とするDNAをどんどん作られる。
科学捜査法
| PCR法 Pplymerase Chain Reaction (ポリメラーゼ連鎖反応) |
サーモスアクアティクスの古細菌のポリメラーゼ Thermous aquaticusのDNA Pplymerase この古細菌は高熱でも生きられる |
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| Taq Polymeraseを使うと マリスさん ノーベル賞受賞 |
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